概要と説明 テスト
マラリアは蚊が媒介する溶血性熱性疾患で、年間 2 億人以上が感染し、100 万人以上が死亡しています。それは、P. falciparum、P. vivax、P. ovale、および P. malariae の 4 種のマラリア原虫によって引き起こされます。これらのマラリア原虫はすべてヒト赤血球に感染して破壊し、悪寒、発熱、貧血、脾腫を引き起こします。P. falciparum は、他の原虫種よりも深刻な病気を引き起こし、ほとんどのマラリアによる死亡の原因となります。熱帯熱マラリア原虫と三日熱マラリア原虫が最も一般的な病原体ですが、種の分布にはかなりの地理的変動があります。
伝統的に、マラリアは、ギムザ染色された末梢血の厚い塗抹標本上の微生物の証明によって診断され、マラリア原虫の異なる種は、感染した赤血球の出現によって区別されます 。この技術は、正確で信頼性の高い診断が可能ですが、定義されたプロトコルを使用して熟練した顕微鏡検査士によって実行された場合に限られます2。これは、世界の遠隔地や貧しい地域にとって大きな障害となります。
マラリア Pf/パン抗原迅速検査キットは、これらの障害を解決するために開発されました。この検査では、熱帯熱マラリア原虫特異的タンパク質であるヒスチジン反復タンパク質 II (pHRP-II) に対するモノクローナル抗体とポリクローナル抗体のペア、および熱帯熱マラリア原虫の 4 種によって産生されるタンパク質である乳酸マラリア原虫 (pLDH) に対するモノクローナル抗体のペアを利用します。マラリア原虫、したがって、P. falciparum および/または他の 3 つのマラリア原虫のいずれかによる感染の同時検出と識別が可能になります。実験装置なしで、訓練を受けていない、または最小限のスキルしか持たない人員でも実行できます。
原理
Pf/ Pan マラリア迅速検査キットは、ラテラル フロー クロマトグラフィー イムノアッセイです。テスト ストリップの構成要素は次のとおりです。1) コロイド金と結合したマウス抗 pHRP-II 抗体 (pHRP II-金結合体) およびコロイド金と結合したマウス抗 pLDH 抗体 (pLDH-金結合体) を含むバーガンディ色の結合パッド、
2) 2 つのテスト バンド (パンと Pv バンド) とコントロール バンド (C バンド) を含むニトロセルロース膜ストリップ。Pan バンドは、マラリア原虫の 4 種のいずれかによる感染を検出できるモノクローナル抗 pLDH 抗体でプレコーティングされています。Pf バンドは、Pf 感染の検出のためのポリクローナル抗 pHRP-II 抗体でプレコーティングされています。 Cバンドはヤギ抗マウスIgGでコーティングされています。
アッセイ中、十分な量の血液検体がテスト カセットのサンプル ウェル (S) に分注され、溶解バッファーがバッファー ウェル (B) に追加されます。バッファーには、赤血球を溶解し、さまざまなマラリア原虫抗原を放出する界面活性剤が含まれています。これらの抗原は、カセットに保持されたストリップを毛細管現象によって移動します。pHRP-II が検体中に存在する場合、pHRP II-金コンジュゲートに結合します。免疫複合体は、プレコートされた抗 pHRPII 抗体によってメンブレン上に捕捉され、ブルゴーニュ色の Pf バンドを形成し、Pf 陽性の検査結果を示します。検体中に pLDH が存在する場合、pLDH 金コンジュゲートに結合します。免疫複合体は、プレコートされた抗 pLDH 抗体によってメンブレン上に捕捉され、バーガンディ色の Pan バンドを形成し、マラリア原虫陽性の検査結果を示します。パン バンドがない場合は、他の 3 つのマラリア原虫のいずれかの検査結果が陽性であることが推奨されます。
テスト バンド (Pan および Pf) がない場合は、陰性の結果が示唆されます。テストには内部コントロール (C バンド) が含まれており、テストバンドの発色に関係なく、ヤギ抗マウス IgG / マウス IgG (pHRP-II および pLDH-gold コンジュゲート) の免疫複合体のブルゴーニュ色のバンドを示すはずです。 .それ以外の場合、テスト結果は無効であり、標本を別のデバイスで再テストする必要があります。
